Epitop Koruma ve Pre-analitik Standardizasyon: İmmunohistokimyada Güvenilirliğin Temelleri


Tütüncü Ş.

6th International Conference on Contemporary Academic Research ICCAR 2025, Konya, Türkiye, 25 - 26 Kasım 2025, ss.439-443, (Tam Metin Bildiri)

  • Yayın Türü: Bildiri / Tam Metin Bildiri
  • Basıldığı Şehir: Konya
  • Basıldığı Ülke: Türkiye
  • Sayfa Sayıları: ss.439-443
  • Ondokuz Mayıs Üniversitesi Adresli: Evet

Özet

İmmunohistokimya (IHC), tanısal patoloji ve translasyonel araştırmalarda temel bir tekniktir, ancak sonuçlarının güvenilirliği büyük ölçüde pre-analitik değişkenlere bağlıdır. Bu derleme, doku fiksasyonu, soğuk iskemi süresi, doku saklama koşulları ve antijen geri kazanımı gibi kritik pre-analitik faktörlerin epitop bütünlüğü ve IHC boyama kalitesi üzerindeki etkilerini, incelemektedir. Formaldehit fiksasyonunun neden olduğu protein çapraz bağlanmaları ve epitop maskelenmesi, IHC analizinin önündeki temel zorluklardır. Soğuk iskemi süresinin uzaması ve fiksasyon süresindeki sapmalar, özellikle meme kanseri biyobelirteçleri gibi hassas antijenlerin degradasyonuna yol açmaktadır. Arşivlenmiş dokuların uzun süreli saklanması sırasında nem ve sıcaklık gibi faktörler, immünoreaktivitenin ilerleyici kaybına neden olmaktadır. Isı ile indüklenen antijen geri kazanımı (HIER), maskelenmiş epitopları ortaya çıkarmak için standart bir yöntem haline gelmiştir, ancak bu tekniğin kendisi de dikkatli bir optimizasyon ve standardizasyon gerektirmektedir. Bu derlemede, pre-analitik süreçlerin standardize edilmesinin, IHC sonuçlarının tekrarlanabilirliğini ve güvenilirliğini artırmak için vazgeçilmez olduğunu, bu alandaki mevcut bilgi birikimini ve gelecekteki araştırma yönelimlerinin önemi amaçlanmaktadır.

Immunohistochemistry (IHC) is a fundamental technique in diagnostic pathology and translational research, but the reliability of its results largely depends on pre-analytical variables. This review examines the effects of critical pre-analytical factors such as tissue fixation, cold ischemia time, tissue storage conditions, and antigen retrieval on epitope integrity and IHC staining quality. Protein cross-linking and epitope masking caused by formaldehyde fixation are key challenges in IHC analysis. Prolonged cold ischemia time and deviations in fixation time lead to degradation of sensitive antigens, particularly breast cancer biomarkers. Factors such as humidity and temperature during long-term storage of archived tissues cause progressive loss of immunoreactivity. Heat-induced antigen retrieval (HIER) has become a standard method for revealing masked epitopes, but this technique itself requires careful optimization and standardization. This review aims to highlight the importance of standardizing pre-analytical processes for improving the reproducibility and reliability of IHC results, as well as the current body of knowledge and future research directions in this field.