Trabzon yöresinde yetiştirilen gökkuşağı alabalıklarında (oncorhynchus mykiss walbaum, 1792) ıchthyophthirius multifiliis yaygınlığı ve moleküler karakterizasyonu


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ondokuz Mayıs Üniversitesi, Lisansüstü Eğitim Enstitüsü, Parazitoloji (veteriner) Anabilim Dalı, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2024

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: ELİF AYGÜR

Danışman: Şinasi Umur

Özet:

Bu çalışmada, Trabzon ilinde farklı ilçelerde bulunan 4 farklı balık çifliğinden alınan Gökkuşağı alabalıklarında salgınlara ve ölümlere neden olan bir protozoon parazit, Ichthyophthirius multifiliis’in farklı parametrelere göre yaygınlığı ve saha suşlarının 18S rRNA gen bölgesi temelinde moleküler yapılarının belirlenmesi ve moleküler karakterizasyonlarının yapılması amaçlanmıştır. Çalışmada Kasım 2021- Ekim 2022 tarihleri arasında bir yıl boyunca dört farklı işletmeden toplam 480 adet gökkuşağı alabalığı Ichthyophthirius multifiliis varlığı yönünden incelenmiş ve bulunan parazitler %85’lik etanol ile tespit edilerek -20 °C’de muhafaza edilmiştir. Tespit edilen I. multifiliis’lerin genomik DNA’sı ticari DNA izolasyon kiti ile ekstrakte edilmiştir. Elde edilen DNA izolatlarıyla, 18S rRNA gen bölgesine ait ve I. multifilis’e özgü primer çifti ile PCR amplifikasyonu yapılmıştır. PCR ürünlerinin DNA nükleotid dizilemesi, Sanger sekanslama yöntemiyle PCR amplifikasyonunda kullanılan aynı primer çifti kullanılarak iki yönlü şekilde yapılmıştır. Filogenetik ağaç, Jukas-Cantor modeli ile UPGMA metodu kullanılarak MEGA11 programında oluşturulmuştur. Tespit edilen I. multifiliis izolatlarının 18S rRNA gen bölgesine ait elde edilen sekans dizileri, belirlenen erişim numaraları ile GenBank veri tabanına kaydedilmiştir. Ayrıca araştırma sonucunda tespit edilen I. multifiliis’lere ait enfeksiyon oranı (prevalans), enfeksiyon yoğunluğu ve toplam parazit sayısı gibi istatistiki verilerin ay, mevsim, balık boyu, balık ağırlığı ve su sıcaklığı gibi parametrelere göre dağılımları belirlenmiştir. Çalışma sonucunda Trabzon ilindeki Gökkuşağı alabalıklarında salgınlara sebep olan dört adet I. multifiliis izolatı tanımlanmıştır. Ichthyophthirius multifiliis türüne ait elde edilen izolatların (ImTR1, ImTR2, ImTR3, ImTR4), 18S rRNA gen bölgesi yönünden Türkiye’de ilk kez moleküler karakterizasyonu ortaya konulmuştur. Bunun yanında izole edilen I. multifiliis parazitlerinin 18S rRNA gen bölgesi yönünden Türkiye’de ilk kez Sanger sekanslama yöntemiyle moleküler analizleri yapılmıştır. Tespit edilen I. multifiliis izolatlarının, hem kendi aralarında hem de GenBank’dan alınan diğer I. multifiliis izolatları ile %100 oranında genotipik olarak benzer olduğu tespit edilmiştir. Ayrıca araştırma sonucunda enfeksiyon oranı ve yoğunluğunun en fazla yavru balıklarda,   20-25 °C su sıcaklığında ve Ağustos ayında görüldüğü belirlenmiştir.